Selvstudium med vejledning, eksperimentelle øvelser og enkelte
forelæsninger.
Kursets varighed:
13-uger eller 3-uger
Evalueringsform:
Hjælpemidler:
Bedømmelsesform:
Obligatoriske forudsætninger:
Deltagerbegrænsning:
Maksimum: 4
Overordnede kursusmål:
Teoretisk og praktisk indføring i kromatografiske metoder til
oprensning af rekombinante proteiner i milligram til
gram-skala.
Læringsmål:
En studerende, der fuldt ud har opfyldt kursets mål, vil kunne:
Redegøre for de kromatografiske principper og den basale teori
for ionbytnings-, hydrofobisk interaktions- og
affinitetskromatografi
Redegøre for de kromatografiske principper og den basale teori
for gelfiltrering og expanded bed adsorption
Redegøre for kromatografiudstyrs (HPLC, high performance liquid
chromatography) opbygning
Redegøre for hastigheden, adskillelsesevnen, genfindingsgraden
og kapacitetens betydning i de enkelte trin i en protein
oprensningsstrategi
Planlægge strategier for oprensning af proteiner, herunder
udvælge og kombinere oprensningsmetoder
Anvende et HPLC instrument og tilhørende kromatografiske
kolonner.
Redegøre for kolonne bærematerialers kemiske og fysiske
egenskaber i hovedtræk
Være bekendt med andre metoder som anvendes ved arbejde med
proteiner f. eks. SDS-PAGE, ultrafiltrering og
frysetørring
Kursusindhold:
Kromatografiske principper og basal teoretisk baggrund for
ionbytnings-, hydrofobisk interaktions- og affinitets-kromatografi
samt gelfiltrering og expanded bed adsorption. Kromatografiudstyrs
opbygning, herunder pumper og detektorsystemer (HPLC, high
performance liquid chromatography). Oprensningsstrategier og deres
optimering. Udvælgelse og kombinationer af oprensningsmetoder.
Kolonne bærematerialers kemiske og fysiske egenskaber. Pakning af
kolonner. En kort introduktion til myndigheders godkendelse af
procedurer til oprensning af protein baseret lægemidler. Håndtering
af proteiner samt en introduktion til andre metoder, der anvendes i
forbindelse med protein oprensning i laboratorieskala f. eks.
SDS-PAGE, ultrafiltrering og frysetørring. Ovenstående illustreres
gennem eksperimentelle øvelser/projekter med anvendelse af HPLC
udstyr til oprensning af udvalgte hovedsagelig rekombinante
proteiner.
