Selvstudium med vejledning, eksperimentelle øvelser og enkelte forelæsninger.
Kursets varighed:
13-uger eller 3-uger
Evalueringsform:
Hjælpemidler:
Bedømmelsesform:
Deltagerbegrænsning:
Maksimum: 4
Overordnede kursusmål:
Teoretisk og praktisk indføring i kromatografiske metoder til oprensning af rekombinante proteiner i milligram til gram-skala.
Læringsmål:
En studerende, der fuldt ud har opfyldt kursets mål, vil kunne:
Redegøre for de kromatografiske principper og den basale teori for ionbytnings-, hydrofobisk interaktions- og affinitetskromatografi
Redegøre for de kromatografiske principper og den basale teori for gelfiltrering og expanded bed adsorption
Redegøre for kromatografiudstyrs (HPLC, high performance liquid chromatography) opbygning
Redegøre for hastigheden, adskillelsesevnen, genfindingsgraden og kapacitetens betydning i de enkelte trin i en protein oprensningsstrategi
Planlægge strategier for oprensning af proteiner, herunder udvælge og kombinere oprensningsmetoder
Anvende et HPLC instrument og tilhørende kromatografiske kolonner.
Redegøre for kolonne bærematerialers kemiske og fysiske egenskaber i hovedtræk
Være bekendt med andre metoder som anvendes ved arbejde med proteiner f. eks. SDS-PAGE, ultrafiltrering og frysetørring
Kursusindhold:
Kromatografiske principper og basal teoretisk baggrund for ionbytnings-, hydrofobisk interaktions- og affinitets-kromatografi samt gelfiltrering og expanded bed adsorption. Kromatografiudstyrs opbygning, herunder pumper og detektorsystemer (HPLC, high performance liquid chromatography). Oprensningsstrategier og deres optimering. Udvælgelse og kombinationer af oprensningsmetoder. Kolonne bærematerialers kemiske og fysiske egenskaber. Pakning af kolonner. En kort introduktion til myndigheders godkendelse af procedurer til oprensning af protein baseret lægemidler. Håndtering af proteiner samt en introduktion til andre metoder, der anvendes i forbindelse med protein oprensning i laboratorieskala f. eks. SDS-PAGE, ultrafiltrering og frysetørring. Ovenstående illustreres gennem eksperimentelle øvelser/projekter med anvendelse af HPLC udstyr til oprensning af udvalgte hovedsagelig rekombinante proteiner.
